所有行為記錄和編碼均使用諾達(dá)思的動(dòng)物運(yùn)動(dòng)軌跡跟蹤系統(tǒng)(EthoVision XT)進(jìn)行。為了記錄超聲波發(fā)聲（USV）的頻率，將一個(gè)超聲麥克風(fēng)懸掛在實(shí)驗(yàn)籠上方或固定在墻壁上，通過諾達(dá)思的聲音行為分析系統(tǒng)(UltraVox XT)進(jìn)行處理和分析。

母親隔離誘導(dǎo)的幼鼠USV測(cè)試

母鼠及其同窩幼崽適應(yīng)實(shí)驗(yàn)房間，然后將母鼠與它們的同窩幼崽隔離。測(cè)試包括：將PND 7幼崽引入測(cè)試室，并使用懸掛在測(cè)試室中心上方5 cm處的超聲麥克風(fēng)記錄5分鐘內(nèi)產(chǎn)生的USV呼叫率（隔離1）。之后，將幼崽放入包含其母鼠的籠子中3分鐘（母子重聚）。最后，將幼崽重新進(jìn)入測(cè)試室，并再次記錄5分鐘的USV（隔離2）。

家庭氣味辨別和偏好測(cè)試

在上一個(gè)測(cè)試后5分鐘進(jìn)行。每個(gè)PND 7的幼崽被單獨(dú)放置在測(cè)試籠的中心，籠子底部鋪有網(wǎng)狀地板，其中一側(cè)放放有干凈墊料，另一側(cè)放有家庭墊料。測(cè)量探索每側(cè)的時(shí)間和超聲波發(fā)聲的頻率，持續(xù)2分鐘。

青少年社交測(cè)試

實(shí)驗(yàn)小鼠被放入測(cè)試籠中，進(jìn)行10分鐘的習(xí)慣化適應(yīng)。一旦將社交刺激小鼠引入籠子，就會(huì)記錄實(shí)驗(yàn)組和刺激組的幼年小鼠（失明和有視力）所表現(xiàn)出的社交行為、非社交行為以及USV，記錄時(shí)間為10分鐘。

雌性尿液誘導(dǎo)的USV和氣味標(biāo)記行為

采集雌性發(fā)情期小鼠尿液樣本。將來自雌性小鼠的尿液滴在紙上，并將雄性小鼠放入實(shí)驗(yàn)籠后開始測(cè)試。對(duì)總的超聲波發(fā)聲次數(shù)、總的嗅覺標(biāo)記次數(shù)、探索雌性尿液所花費(fèi)的時(shí)間以及總的移動(dòng)距離進(jìn)行錄像，并分析。為了量化嗅覺標(biāo)記，在紙上放置一個(gè)帶有1平方厘米方格的透明網(wǎng)格，并記錄每個(gè)被尿液標(biāo)記的方格被計(jì)為一個(gè)氣味標(biāo)記單位，統(tǒng)計(jì)整個(gè)籠子和雌性尿液斑點(diǎn)周圍氣味標(biāo)記總數(shù)。